即时检验(Point-Of-Care Testing,POCT)也称床边检测,是指便于在病人旁边进行的临床检测,不一定是由临床检验师来进行,而且在采样现场即刻进行分析,省去标本在实验室检验时的复杂处理程序,能够快速得到检验结果的一类检验方法,其核心要素在于满足临床治疗或家用监护所需的快速诊断需求,以快速、即时得到可信赖的诊断结果为最终目标。近年来,作为一种新的临床检验手段,POCT具有快速简便、效率高、成本低、检验周期短、标本用量少等优点,同时,其试剂稳定且便于保存和携带,在临床应用中得到了迅速发展,已经被广泛用于临床,甚至自我检测。目前POCT 已经可以检测多个指标,包括血糖、血气/电解质、凝血、心脏/肿瘤标志物、毒品/酒精检测等,应用范围也不仅限于医疗机构,在诸如自然灾害救助、军事领域、反恐怖袭击等领域也有所应用。
凭借快速、便捷的优势,加之新兴技术不断涌现,使得POCT 成为IVD 领域内快速增长的蓝海,2013年,全球POCT的市场规模约为100亿美元,平均增长速度在8%,中国约为5亿美元,增速在15%以上,远高于全球平均增长速度。
POCT检测技术按照其基本原理基本可分为四大类:(1) 把传统方法中的相关液体试剂浸润于滤纸和各种微孔膜的吸水材料内,成为整合的干燥试剂快,然后将其固定于硬质型基质上,成为各种形式的诊断试剂条,如早早孕试纸等;(2)将传统仪器微型化,操作方法简单化,使之成为便携式和手掌式的设备,如快速血糖仪等;(3)将上述两者整合为统一的系统,如临床普遍使用的尿液分析仪;(4)应用生物芯片、生物感应技术,实现对待测物的快速、高通量、准确的检测,如电化学技术和光学生物传感器去测定葡萄糖、电解质和动脉血气等。
干化学分析技术
干化学分析技术是相对于湿化学分析技术而言的,是以被检测样品中的液体作为反应媒介,待测物直接与固化于载体上干试剂进行反应,加上检验标本后产生颜色反应,用眼观定性或仪器检测半定量,其中包括单层试纸技术和多层涂膜技术,适用于全血、血清、血浆、尿液等各类样品。目前被广泛应用的血氨检测试纸、血糖检测试纸、尿糖检测试纸以及尿液干化学分析属于单层试纸技术,临床使用的干化学分析系统属于多层涂膜技术,其应用于血液化学成分如脂类、糖类、蛋白质、尿素氮、电解质、酶等含量的测定。多层涂膜技术是从感光胶片制作技术移植而来,将多种反应试剂依次涂布在片基上,制成干片,采用多层涂膜技术制成的干片,比单层试纸技术平整均匀,用仪器检测,可以准确定量。
胶体金免疫标记技术
由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠等的作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,称为胶体金。以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的新型免疫标记技术称为胶体金免疫标记技术,胶体金、银、硒及色素(包括荧光色素和非荧光色素)可以牢固吸附在抗体的表面而不影响抗体的活性,当标记抗体与抗原反应聚集到一定浓度时,可以直接呈现颜色。目前胶体金免疫标记技术主要有斑点免疫层析法和斑点免疫金渗滤法,可用于快速检测蛋白质类和多肽类抗原,如血清白蛋白及一些病毒如HBV、HCV、HIV等的抗原和抗体定性,配合小型检测仪,可进行半定量和定量测定。
生物传感器技术
生物传感器是一种对生物物质敏感并能够将其浓度转换为电信号进行检测的仪器,是由固定化的生物敏感材料作识别原件、适当的理化换能器(如氧电极、光敏管、场效应管、压电晶体等)及信号放大装置构成的分析工具或系统。生物传感器技术使用固定化的生物分子结合换能器,直接用于靶分析物的测定,无需从基质中分离,它结合了免疫化学、酶化学、电化学与计算机技术,可以对生物体液中的分析物进行超微量的分析,例如电解质、葡萄糖和动脉血气的检测等。随着抗体固定技术和特异DNA序列的应用,生物传感器探针将很快用于检测激素、药物、结核菌等。
生物芯片技术
生物芯片技术是通过缩微技术,根据分子间特异性地相互作用的原理,将分析过程集成于硅芯片或玻璃芯片表面的微型生物化学分析系统,将所有试样处理及测定步骤合并于一体,在很短时间和空间间隔内获取电信号形式表达的化学信息,以实现对细胞、蛋白质、基因及其他生物组分的准确、快速的高通量检测。目前生物芯片可分为基因芯片、蛋白质芯片、细胞芯片和芯片实验室,具有高通量、微型化、集成化、自动化、防污染等特点,能够快速准确地获取样品中的生物信息,效率远高于传统检测手段。
红外和远红外分光光度技术
红外分光光度技术是利用物质对红外光区电磁辐射的选择性吸收的特性来进行结构分析、定性和定量的分析方法。红外和远红外分光光度技术常用于制作经皮检测仪器,可用于检测血液血红蛋白、胆红素、葡萄糖等多种成分,这类检测仪器可连续监测病人血液中的目的成分,无需抽血,可以避免抽血可能引起的交叉感染和血液标本的污染,同时降低检验成本、缩短报告时间,但是这类检测技术的准确性有待提高。
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